Fiala per coltura liquida Mondo

Mondo Fiala di coltura liquida

Una fiala di coltura liquida è una soluzione in cui vengono iniettate le spore di un fungo. Grazie a questa soluzione, le spore germinano più facilmente e più velocemente. Di conseguenza, non dovrete aspettare settimane per avere i vostri funghi psilocybe dal momento in cui farete gocciolare questa coltura liquida sul substrato. Un barattolo di spore è anche molto concentrato e presto si sovradoserà il substrato. Con questo liquido è possibile attenuare la concentrazione, consentendo di distribuire meglio le spore sul substrato e quindi di ottimizzare la colonizzazione. Tuttavia, è importante che dopo aver iniettato le spore in questo liquido, si agiti bene e con forza la fiala per circa una settimana. L'agitazione favorisce la germinazione delle spore.

Requisiti della fiala di coltura liquida Mondo

• Fiamma a gas (l'accendino "storm" funziona meglio)
• Fiala di sospensione di spore SporeMate o siringa di spore, fiala di coltura liquida Mycomate (contenente micelio), kit di clonazione Mycomate o altro terreno di coltura adatto.
• Kit Mycomate Edible Mushroom o Sclerotia, o altro terreno/substrato adatto al processo di crescita (quando si desidera ottenere funghi come risultato finale)
• Mani pulite e un luogo pulito in cui lavorare

Come preparare la mia fiala di coltura liquida Mondo in 11 passi

1. Se conservata in frigorifero, togliere la fiala di coltura liquida dal frigo 24 ore prima dell'uso.
2. Lavarsi accuratamente le mani (è possibile utilizzare un sapone antibatterico) e asciugarle con carta da cucina.
3. Rimuovere la fiala di coltura liquida dalla busta e posizionarla su un tavolo pulito e privo di correnti d'aria.
4. Pulire il sito di iniezione della fiala di coltura liquida e qualsiasi altro sito di iniezione richiesto (fiala di sospensione di spore o fiala di coltura liquida colonizzata) con una salvietta alcolica. Utilizzare una nuova salvietta alcolica per ogni sito di iniezione utilizzato. Questa operazione è necessaria per evitare di dare una possibilità ai batteri.
5. Rimuovere la siringa/ago dalla busta. Rimuovere la plastica che protegge l'ago (girare a destra e tirare). Non toccare la parte superiore dell'ago, altrimenti dovrà essere risterilizzato*. (Vedi foto A) *Gli aghi possono essere sterilizzati alla fiamma. Tenere l'ago nella fiamma finché non diventa rosso. Fare attenzione a non scaldarsi troppo e a non fondere la plastica a cui è attaccato l'ago. Lasciare sempre raffreddare l'ago prima dell'iniezione!
6. Quando si usa la fiala di sospensione di spore o di coltura liquida colonizzata, agitare prima la fiala per distribuire bene la sospensione. Tenere la fiala in posizione obliqua e inserire l'ago al centro del sito di iniezione. Aspirare la parte di sospensione desiderata e ritirare l'ago. Fare attenzione a non far entrare aria nell'ago. (vedi foto B)
7. Iniettare da poche gocce a 1 ml di sospensione di spore o poche gocce di sospensione di coltura liquida colonizzata (se si utilizzano più fiale di coltura liquida) nella fiala di coltura liquida. Rilasciare con cautela l'ago dalla fiala, poiché la sovrapressione potrebbe far schizzare fuori un po' di sospensione (non è un problema). (Vedere foto C)
8. Pulire nuovamente il sito di iniezione della fiala per coltura liquida con una salvietta di alcool, lasciarla asciugare per un po' e conservarla in un sacchetto (ziplock) senza aria e in posizione verticale.
9. Agitare la fiala (10 secondi) una volta al giorno e non esporla alla luce del sole. Incubare le spore in micelio a una temperatura adeguata (di solito 23-27 º C). Una temperatura più bassa rallenta il processo di crescita, ma una temperatura più alta aumenta il rischio di contaminazione. (Vedi foto D) Nota: le temperature variano per ogni varietà di fungo.
10. La crescita è la stessa sia per le spore che per la coltura liquida. La crescita dalle spore richiede più tempo rispetto alla coltura liquida. Sospensione di spore: le spore germinano normalmente entro 24-72 ore. Entro 3-7 giorni si dovrebbe poter osservare la colonizzazione (crescita insieme) del micelio nella parte inferiore della fiala. Nota: la fiala di coltura liquida MycoMate necessita di poche spore per la crescita del micelio. Coltura liquida: la crescita è visibile entro 24 ore dal trasferimento della sospensione di coltura liquida nelle nuove fiale di coltura liquida. Le nuove fiale sono solitamente pronte all'uso in pochi giorni (a seconda della varietà, della specie e della temperatura). Il modo migliore per osservare se il processo di crescita procede bene è quello di tenere la fiala alla luce, senza agitarla. Se avete agitato, i sedimenti del terreno di coltura si solleveranno, rendendo più difficile vedere la crescita (non è un problema, si attenua da solo). Le nuvole bianche di micelio galleggeranno in alto, quando avrete preso in mano la fiala in modo corretto (vedi foto D). Anche se il micelio ha l'aspetto di nuvolette, non tutta la fiala deve essere torbida/torbida. Con un micelio sano, dovrebbe essere possibile vedere attraverso le nuvole. In caso contrario, la fiala è probabilmente contaminata. Lasciare riposare la fiala per qualche ora e verificare che non siano stati i sedimenti del terreno di coltura a causare l'intorbidimento. La fiala può essere utilizzata non appena è visibile una crescita sana del micelio o dopo 1 o 2 settimane quando è visibile un numero maggiore di miceli sani. Nota: quando uno o due terzi della fiala è colonizzata, deve essere utilizzata o conservata in condizioni di refrigerazione per un uso successivo (vedi sotto).
11. Una volta completata la colonizzazione, la fiala può essere utilizzata per inoculare altre fiale di coltura liquida MycoMate (ripetere i passaggi da 1 a 10), inoculare i kit di funghi commestibili o di sclerozi MycoMate (ripetere i passaggi da 1 a 6).

Contenuto del flacone di spore della fiala di coltura liquida Mondo

• Mondo Liquid Culture Vial da 10 e 25 ml
• Salviette alcoliche sterili
• Siringa sterile con ago da 18

Conservazione del flacone Mondo Liquid Culture Vial Spore

Poiché si tratta di un prodotto delicato, si consiglia di riporre la fiala di spore in frigorifero subito dopo averla ricevuta per 24 ore a una temperatura compresa tra 2 e 8 gradi prima di utilizzarla.